微生物培養(yǎng)基配制與滅菌實(shí)操：避免污染的關(guān)鍵技巧
- 時(shí)間：2026-01-16
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無菌操作與儲(chǔ)存管理：阻斷后續(xù)污染途徑
即使完成配制和滅菌，后續(xù)的分裝、倒平板及儲(chǔ)存環(huán)節(jié)仍可能引入污染，需嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范。
1. 倒平板的無菌操作要點(diǎn)
倒平板是固體培養(yǎng)基使用前的關(guān)鍵步驟，操作不當(dāng)極易導(dǎo)致污染，具體流程如下：
預(yù)熱與消毒：將滅菌后的固體培養(yǎng)基置于 50℃水浴鍋中保溫，防止提前凝固；超凈工作臺(tái)紫外消毒 30min 后通風(fēng)，實(shí)驗(yàn)人員穿戴無菌服、口罩、手套，雙手用 75% 酒精消毒。
火焰滅菌操作：在酒精燈火焰旁開啟錐形瓶棉塞，瓶口快速通過火焰滅菌，防止瓶口雜菌落入。
倒平板規(guī)范：每皿倒入 15–20mL 培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)皿使培養(yǎng)基均勻分布，避免產(chǎn)生氣泡；若出現(xiàn)氣泡，可用無菌接種環(huán)輕輕挑破。
凝固與保存：待培養(yǎng)基完全凝固后，將培養(yǎng)皿倒置存放（防止冷凝水滴落污染培養(yǎng)基表面），標(biāo)記培養(yǎng)基名稱、配制日期，置于 4℃冰箱保存，保存時(shí)間不超過 7 天。
2. 培養(yǎng)基儲(chǔ)存的注意事項(xiàng)
儲(chǔ)存條件：固體培養(yǎng)基平板倒置存放于 4℃冰箱，避免陽光直射；液體培養(yǎng)基密封后冷藏，防止揮發(fā)和污染。
有效期管理：普通培養(yǎng)基冷藏保存不超過 1 周；含抗生素、血清等特殊成分的培養(yǎng)基需現(xiàn)配現(xiàn)用，最長(zhǎng)不超過 3 天。
污染判定：儲(chǔ)存過程中若培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、異味、菌落或顏色變化，立即丟棄，嚴(yán)禁使用。
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