在實施GMP過程中，都遇到一個難題，就是如何進行清潔驗證。按GMP要求，企業必須對制藥設備的清潔方法進行驗證，以確認清潔方法的有效性。但依照目前國內現有的技術水平，很難找到一種合適的驗證方法。國外進行清潔驗證，比較常用的驗證方法主要有HPLC法、uv，Vis分光驗證料和清潔劑的理想方法。TOC法的靈敏度可達億分之一，而且與HPLC法和uv，W8分光光度法相比．具有不需摸索活性成分的檢測方法和考慮樣品的因素，較為省時等優點。，注射用水和純化水的標準中采用了TOC法測定有機物含量。將其方法簡單修改后可用于清潔驗證。

TOC法包括碳的氧化和檢測生成的二氧化碳兩個過程。現有多種氧化技術，包括光觸酶氧化、化學氧化及高溫灼燒等。應用TOC法Ⅲ進行清潔驗證的方法做一簡單介紹，以供參考。在驗證中采用的是自行生產的測定儀，配有自動取樣toc測定儀器檢鋇j儀的檢測原理是根據直接往水樣中滴加磷酸并調節pH至2—3左右。在此pH條件下，樣品中的所有無機碳會以C0，的形式釋放出來，進入氨氣載氣中，直接被一個非色散的紅外線探測器(帥m)檢測此時，假想樣品中剩余的碳已全部為有機碳，在紫外照射條件下，向樣品中加入過硫酸鈉氧化劑，樣品中剩余的碳都被氧化成C0，根據NDIR測得的C0，的量可確定水樣中的總有機碳量。

對于設備清潔驗證，主要有兩種TOC取樣技術一種是用棉簽直接在設備表面擦拭取樣，另一種則是用高純化水最終清洗設備，對清洗液取樣進行檢測。通常，對設備表面直接取樣可顯示取樣部位的真實清潔程度。本次研究的目的就是通過對不銹鋼表面上不同有機殘留物的檢測來證明1Dc法的有效性及評價測定儀的效能。考核的參數包括線性、檢測限、定量限、準確度、精確度以及擦拭回收率。

1 線性

TOE法測定的化合物濃度與測定儀檢測數據之間應存在一種線性關系。現選用4種不同清潔劑來考察線性：CIP一1130 (堿性)、CIP一200 (酸性)、Alconox(乳化劑)、Triton—X100 (潤濕劑)。結果相關系數范圍從0．9787到0．9998。由于易產生泡沫，泡沫會使測定的結果偏低于真實值．同時另取3個活性成分進一步進行線性考查：輔料(蔗糖)、抗生素(萬古霉素)和內毒素，結果3種化合物都顯示出良好的線性關系，相關系數從0．9996到0．9998。

2 檢測限和定量限

采用空白試驗法來確定TOE 法檢測限(MDL)。試驗中的清洗液為低TOC水(<25 X1O|9)，將1O個已清潔小玻璃瓶灌滿低TOE水，每個小玻璃瓶內放入一個棉簽(切除末端)將溶液渦流振蕩，并在檢測前放置1h．每個小瓶測4次．將4個檢測結果平均，再將1O個空白小瓶的平均測定值平均，然后計算標準偏差。相對于自由度為n～1時，用標準偏差乘以自由度為9、置信限為99％時的f值(3．25，n=lO)確定TOE法的檢測限(MDL)，經計算MDL為50X10一，將MDL乘以3可得到定量限為150X 10一。